人封闭抗体(BA)定性检测试剂盒 ELISA在国内众多实验室被广泛使用，深受广大科研者的好评。上海轩泽康生物专ye供应酶联免疫分析试剂盒，部分现货供应产品有人、大鼠、小鼠、兔、猪、犬、鸡、猴、植物等ELISA试剂盒。所有elisa试剂盒均提供免费代测，实验全程提供技术指导。欢迎咨询、订购！

一.   检测原理：试剂盒采用双抗一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被抗原的包被微孔中，依次加入标本、HRP标记的检测抗原，经过温育并洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD 值），与CUTOFF值相比较，从而判定标本中人封闭抗体（BA）的存在与否。

二. 96T试剂盒组成及其配置：

①微孔酶标板（ 12 孔×8 条）；

②阴性对照 0.5mL；

③阳性对照 0.5mL；

④检测抗原-HRP 10mL；

⑤20×洗涤缓冲液 25mL；

⑥稀释液 6mL；

⑦底物 A 6mL；

⑧底物 B 6mL；

⑨终止液 6mL；

⑩封板膜 2 张；说明书 1 份；自封袋 1 个.

备注：20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按 1：20 稀释，即 1 份的 20×洗涤缓冲液加 19 份的蒸馏水。

三. 人封闭抗体(BA)定性检测试剂盒 ELISA操作步骤:

①从室温平衡 20min 后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回 4℃。

②设置阴、阳性对照孔和样本孔，阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照各 50μL；

③待测样本孔先加待测样本 10μL，再加稀释液 40μL；

④随后阴、阳性对照孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗原 100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育 60min。

⑤弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置 1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板 5 次（也可用洗板机洗板）。

⑥每孔加入底物 A、B 各 50μL，37℃避光孵育 15min。

⑦每孔加入终止液 50μL，15min 内，在 450nm 波长处测定各孔的OD 值。

上海轩泽康生物有限公司提供免费代测，高校客户可报销后付款，部分进口原装试剂盒可享受折扣价格，可送货上门，试剂盒质量问题包退换。，酶联免疫法/酶免法（ELISA）凡购买本公司ELISA检测试剂盒可提供代测服务。

五. 实验结果判断：

①试验有效性：阳性对照孔 OD 值平均值≥1.00； 阴性对照孔 OD 值平均值≤0.15。

② 临界值（Cut off）计算：临界值=阴性对照孔平均值+0.15

③阴性判断：样品 OD 值＜临界值（Cut off），样品为阴性

④阳性判断：样品 OD 值＞临界值（Cut off），样品为阳性

常见问题解答：

1.   问：如何选择合适的阳性对照？

上海轩泽物解答：阳性对照的基本组成应该尽量与检测样本的组成一致，一般阳性对照多以含蛋白保护剂的缓冲液为基质，加入一定量的待检物质。比如：以人血清为标本的测定，阳性对照多用确定的病人血清或者以覆盖人血浆为原料加入一定量标准品。

2. 问：我能否在实验开始前*收集样品？

上海轩泽物解答：可以。如若收集的样本不能及时进行检测，请保存至-20℃或按照说明书进行保存。应避免反复冻融。

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